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慢性粒细胞性白血病中SHIP1基因的表达变化及机制探讨北大核心CSCDCSTPCD
作者：刘小军罗建民杨琳温树鹏姚丽杜行严杨敬慈董作仁
发表期刊：解放军医学杂志 2008年6期
关键词：白血病,髓样,慢性BCR/ABL基因SHIP1基因RNA,小分子干扰
摘要：目的观察SHIP1基因在慢性粒细胞性白血病(CML)患者中的表达变化,并通过特异性小干扰RNA(siRNA)封闭K562细胞株BCR-ABL基因的表达,探讨BCR-ABL基因表达对SHIP1基因的影响.方法应用RQ-PCR方法检测CML患者骨髓、正常人外周血白细胞及白血病细胞株K562中SHIP1基因表达的差异.另取K562细胞分为3组:空白对照组(不加任何干扰成分);非特异性siRNA处理组(加非特异性siRNA);特异性siR…查看全部>>
慢病毒介导的EZH2靶向RNA干扰对人卵巢癌SKOV3细胞增殖的影响CSCDCSTPCD
作者：闫忠鑫翟小龙韩凤娟丁涛蔡冬燕赵立军
发表期刊：现代妇产科进展 2012年7期
关键词：卵巢肿瘤RNA,小分子干扰慢病毒属细胞增殖EZH2SKOV3
摘要：目的:通过慢病毒介导的EZH2-shRNA干扰载体,沉默人卵巢癌SKOV3细胞中果蝇zeste基因的人类同源物(EZH2)的表达,探讨靶基因EZH2对卵巢癌细胞增殖的影响.方法:设计含EZH2基因序列的shRNA慢病毒干扰载体,转染人卵巢癌SKOV3细胞株；利用CCK-8比色法检测EZH2基因沉默后对SKOV3细胞增殖的影响；利用RTPCR、Western blot分别检测EZH2、PCNA mRNA及蛋白的表达情况.结果:EZH2-…查看全部>>
HLA-G基因siRNA真核表达质粒的构建及其对转染JEG-3细胞株HLA-G表达的抑制作用CSTPCD
作者：陈建辉姚元庆侯开波王晓蓉雷迎峰尹文
发表期刊：实用医学杂志 2007年15期
关键词：HLA抗原RNA,小分子干扰转染JEG-3细胞
摘要：目的:构建针对人类白细胞抗原-G基因(human leukocyte antigen-G,HLA-G)基因siRNA表达质粒,观察其对转染JEG-3细胞的HLA-G基因表达的抑制作用.方法:选择RNA干涉靶序列,体外合成两段互补的寡核苷酸,通过与线性化pSuppressor-U6-neo连接、转化大肠杆菌,扩增、纯化得到所需质粒,通过琼脂糖凝胶电泳及基因测序鉴定其分子量及插入片段的序列.将重组真核表达质粒pSuppressor-U6-…查看全部>>
LINE-1 ORF-1p对肝脏肿瘤细胞系和肝源永生化细胞系增殖的调控作用北大核心CSCDCSTPCD
作者：冯帆高旭东陆荫英张帆王博常秀娟曲建慧王春平杨永平
发表期刊：解放军医学杂志 2012年3期
关键词：肝肿瘤RNA,小分子干扰LINE-1 ORF-1p细胞增殖
摘要：目的研究反转座子LINE-1编码蛋白LINE-1 ORF-1p对肝脏肿瘤细胞系以及肝源永生化细胞系增殖能力的影响.方法构建针对LINE-1 ORF-1编码序列的siRNA表达载体(LINE-1 ORF-1p psilence2.1-U6-siRNA),转染肝脏肿瘤细胞系Bel-7402、SMMC-7721、HepG2和肝源水生化细胞系LO2.采用Western blotting检测LINE-1 ORF-1p siRNA表达载体对…查看全部>>
人MAVS小干扰RNA质粒的构建及稳定干扰MAVS细胞株的筛选北大核心CSCDCSTPCD
作者：贾永侠赵帆马红芳李力黄蓓郑子瑞宋婷魏从文何湘张艳红钟辉
发表期刊：军事医学科学院院刊 2008年6期
关键词：MAVSRNA,小分子干扰荧光素酶试验转录活性
摘要：目的:构建人线粒体抗病毒信号蛋白(mitochondrial antiviral signaling protein,MAVS)的小干扰RNA真核表达质粒,并筛选出稳定干扰MAVS的细胞株.方法:根据文献报道的序列和载体的黏性末端,设计合成2条针对MAVS的DNA序列,退火后连接到载体pSUPER.retro.neo+gfp上,经测序分析正确后,质粒命名为psiMAVS.用脂质体转染质粒到MCF-7细胞中,经G418加压筛选稳定表达M…查看全部>>
NgR特异性siRNA筛选及其表达载体构建北大核心CSCDCSTPCD
作者：刘百峰张涛袁文吕碧涛徐盛明何成
发表期刊：中国临床康复 2006年42期
关键词：质粒RNA,小分子干扰核酸类,核苷酸类和核苷类脊髓损伤
摘要：目的:将siRNA技术应用于NgR,筛选出高效的NgR(Nogo受体)特异性siRNA,并构建其表达载体.方法:2005-03/2006-03,在杭州新瑞佳生物制药有限公司、解放军第二军医大学神经生物教研室设计筛选NgR特异性siRNA,按照E1bashir等设计原则和siRNA的要求,设计、合成4对siRNA,转染体外培养大鼠原代皮层和海马细胞,筛选出基因高沉默效率的NgR特异性siRNA;2004-03/2005-03上海生工生物…查看全部>>
RNA干扰抑制胰腺癌细胞XIAP表达对化疗敏感性的影响CSCDCSTPCD
作者：菅远志李宜雄吕新生李小刚兰明银
发表期刊：中国普通外科杂志 2006年11期
关键词：RNA,小分子干扰胰腺肿瘤/药物疗法凋亡抑制蛋白细胞凋亡
摘要：目的探讨运用载体介导的RNA干扰技术对X-连锁的凋亡抑制蛋白的抑制效率,以及观察抑制XIAP后胰腺癌细胞对化疗药物敏感性的变化.方法应用PBSHHI质粒构建针对XIAP的RNA干扰载体,转染胰腺癌细胞系SW1990;用RT-PCR和Westem blot检测XIAP的抑制效率,以gemcitabine处理细胞,流式细胞仪和荧光显微镜观察细胞凋亡的变化;分析XIAP的表达与细胞凋亡之间的关系.结果成功构建4个XIAP的RNA干扰载…查看全部>>
siRNA表达载体对MCF-7细胞生长及其hTERT基因表达抑制的研究北大核心CSCDCSTPCD
作者：赵矫曾永秋税青林赵小平刘岚陈绍坤
发表期刊：解放军医学杂志 2008年3期
关键词：RNA,小分子干扰基因表达
摘要：目的构建人端粒酶反转录酶(hTERT)基因的RNA干扰(RNAi)表达载体,探讨该载体对人乳腺癌MCF-7细胞生长及hTERT基因表达的影响.方法设计针对hTERT基因的干扰靶序列,构建siRNA重组表达质粒pGenesil-hTERT,将该质粒酶切测序鉴定后,以脂质体转染MCF-7细胞,RT-PCR和Western blot技术分别检测hTERT基因及其蛋白的表达,MTT法观察转染后MCF-7细胞生长情况.结果酶切电泳和…查看全部>>
Smo siRNA对LoVo细胞Smo基因表达及细胞增殖与凋亡的影响北大核心CSCDCSTPCD
作者：朱达坚方驰华戎祯祥刘胜军
发表期刊：南方医科大学学报 2007年9期
关键词：结直肠肿瘤Smoothened基因RNA,小分子干扰细胞凋亡
摘要：目的研究Smoothened (Smo)小干扰RNA(siRNA)对结直肠癌LoVo细胞Smo基因表达,以及LoVo细胞增殖与凋亡的影响.方法设计针对目标基因的siRNA.阳性脂质体介导转染LoVo细胞,半定量RT-PCR检测转染后LoVo细胞的Smo mRNA水平,MTT法和流式细胞术检测转染后LoVo细胞的增殖水平及细胞凋亡率.结果 siRNA-1、siRNA-2均能抑制LoVo细胞Smo基因的表达,siRNA-1抑制作用最明…查看全部>>
小干扰RNA沉默EGFR基因对卵巢癌细胞侵袭力的影响CSTPCD
作者：宋慧陈爱平杨蕊蕊张红玲
发表期刊：青岛大学医学院学报 2009年5期
关键词：卵巢肿瘤RNA,小分子干扰基因,erbB-1侵袭力
摘要：目的通过小干扰RNA(siRNA)沉默表皮生长因子受体(EGFR)基因的表达,旨在探讨其对卵巢癌SKOV3细胞体外侵袭力影响.方法体外构建靶向EGFR基因siRNA质粒和阴性对照质粒, Lipofectamin 2000介导转染到SKOV3细胞中.实验分空白对照组、非特异性转染组、特异性转染组.采用RT-PCR和免疫细胞化学法检测EGFR基因mRNA和蛋白表达水平;采用平板克隆形成法检测细胞生长增殖能力;采用Transwel…查看全部>>

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