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对虾白斑综合征病毒VP28酵母表面展示北大核心CSCDCSTPCD
作者：李新新刘庆慧张秀丽黄倢
发表期刊：渔业科学进展 2012年1期
关键词：对虾白斑综合征病毒VP28酵母表面展示安全性
摘要：以pYD1为载体,制备以酒精酵母为载体的基因工程免疫制剂.参照GenBank中对虾白斑综合征病毒VP28基因序列设计引物,PCR扩增得到预期长度的产物,双酶切插入用于酒精酵母表面展示的穿梭质粒载体pYD1,转化大肠杆菌TOP10,提取阳性质粒转化酒精酵母菌株EBY100,诱导表达后,用免疫荧光检测外源蛋白的表达.结果获得VP28酵母表面展示菌,测得最佳诱导时间为36～48 h.以此展示酵母活细胞分设两个浓度组,腹腔注射螯虾,检测其毒性…查看全部>>
木糖异构酶在酿酒酵母表面表达及对木糖代谢影响的初步研究CSCDCSTPCD
作者：侯进沈煜鲍晓明
发表期刊：生物加工过程 2006年1期
关键词：酵母表面展示α-凝集素木糖异构酶酿酒酵母
摘要：利用α-型酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)表面展示系统的载体,将来源于嗜热细菌Thermus thermophilus的木糖异构酶基因xylA,插入到酿酒酵母蔗糖酶信号肽序列与α-凝集素的C端编码序列之间,形成融合表达框,构建重组质粒pSY-xy222,转化酿酒酵母H158.含重组质粒的菌株H158-SXI木糖异构酶活性测定表明,细胞壁上酶活测定值为1.53 U,木糖异构酶在酿酒酵母细胞壁上得到活性表达.木…查看全部>>
人杀菌通透性增强蛋白功能性N端片段在酵母细胞表面的展示和鉴定北大核心CSCDCSTPCD
作者：李晶琴李慎涛温铭杰吕喆孙宝清许子华孔庆利安云庆
发表期刊：中国免疫学杂志 2007年8期
关键词：人杀菌通透性增强蛋白酵母表面展示内毒素
摘要：目的:建立BPI23酵母细胞表面展示方法,使之表达具有生物活性的BPI23蛋白.方法:构建pYD1-BPI600重组质粒,转化酵母细胞,经半乳糖诱导使BPI23在酵母细胞表面表达;采用间接免疫荧光法,用荧光显微镜和流式细胞仪检测BPI23在酵母细胞表面的展示情况;采用鲎基质显色法,检测BPI23 中和内毒素的生物学活性.结果:酶切和DNA测序鉴定证实,pYD1-BPI600重组质粒含有人BPI600基因片段.荧光显微镜和流式细胞仪检测…查看全部>>
酿酒酵母表面展示南极假丝酵母脂肪酶B的酶学性质研究CSTPCD
作者：黄登峰潘志友林影韩双艳郑穗平
发表期刊：现代食品科技 2008年7期
关键词：酵母表面展示南极假丝酵母脂肪酶B全细胞催化酶学陛质
摘要：本文对酿酒酵母表面展示南极假丝酵母脂肪酶B(Candida antarctica lipase B,CALB)的-般酶争I生质进行研究,得出如下结论:酵母表面展示CALB在碱性条件下具有很好的稳定性和水解活性.其水解对硝基苯酚酯的最适反应pH值范围是8.0～8.5,与游离的CALB商品酶相比,向碱性条件偏移.最适反应温度范围是40～45℃.最适反应底物为对硝基苯酚丁酸酯,表现出极为明显的底物特异性.Ca2+、Mg2+对其有明显的激活作…查看全部>>
人源蛋白酶体α亚基6的酵母表面展示及表达优化CSTPCD
作者：唐语谦林影韩双艳梁世中
发表期刊：陕西科技大学学报(自然科学版) 2007年6期
关键词：泛素-蛋白酶体途径蛋白酶体α亚基6酵母表面展示
摘要：为构建人源蛋白酶体α亚基6(hPSA6)的酵母表面展示体系用于抗体表位分析和研究泛素-蛋白酶体途径,并优化hPSA6的展示表达,将基因PSA6_HUMAN克隆于表达载体pICAS-H,该载体带有His.tag标签可检测表达水平.经过重组酵母的培养,用抗His.tag或抗hPSA6的单克隆抗体和荧光二抗进行免疫荧光染色,通过流式细胞仪和荧光显微镜检测到hPSA6已经成功地展示于酿酒酵母表面.通过对培养基中不同初始浓度的葡萄糖和酸水…查看全部>>
海洋哈维氏弧菌溶血素蛋白在酵母菌细胞表面上的展示及其活性的测定北大核心CSCDCSTPCD
作者：朱开玲池振明梁丽琨吴龙飞
发表期刊：高技术通讯 2007年1期
关键词：溶血素酵母表面展示荧光染色流式细胞术活疫苗
摘要：为制备以酒精酵母为载体的基因工程疫苗,参照其Genbank中基因序列设计一对引物,PCR扩增得到预期长度的产物,双酶切插入用于酒精酵母表面展示的穿梭质粒载体pYD1,转化大肠杆菌TOP10,提取阳性质粒转化酒精酵母菌株EBY100,诱导表达后,用免疫荧光和流式细胞仪检测外源蛋白的表达,结果测得最佳诱导时间为36～48h,诱导培养后约30.0%左右的酵母细胞表达外源蛋白;同时以EBY100和转空质粒的酵母菌株为对照,测得诱导培养后的阳性…查看全部>>
β-1,3-1,4-葡聚糖酶在工业酿酒酵母表面的诱导展示表达研究北大核心CSCDCSTPCD
作者：张伟郭钦阮辉何国庆
发表期刊：中国食品学报 2010年5期
关键词：酿酒酵母诱导酵母表面展示1,3-1,4-葡聚糖酶
摘要：基于絮凝素FL01基因片段为锚定序列,构建以诱导型GAL1启动子介导的表达栽体YEP-GMPFAK,并实现以半乳糖为诱导剂,β-1,3-1,4-葡聚糖酶在酿酒酵母表面的展示表达.酵母转化子发酵实验表明,在pH6.0、50℃培养条件下,经2%半乳糖诱导24 h,表面展示酶活达到最大值322.83 U/g细胞干重.酶学性质测定表明,展示表达的β-1,3-1,4-葡聚糖酶具有良好的热稳定性.
酵母表面展示系统的改进及其在筛选烟草 PMT 基因启动子结合蛋白中的应用北大核心CSCDCSTPCD
作者：陈红牛海峡王文静马浩然李加纳柴友荣张洪博
发表期刊：作物学报 2014年12期
关键词：酵母表面展示Smart cDNA 文库DNA 结合蛋白酵母单杂交PMT 基因
摘要：筛选 DNA 结合蛋白常用的酵母单杂交系统在应用中有时会因内源干扰而影响筛选结果。与之相比，酵母表面展示系统(yeast surface display system)将外源蛋白展示在细胞表面，可通过接近体外实验的方法筛选 DNA 结合蛋白，能在一定程度上避免酵母内源干扰，但是，该系统在 DNA 结合蛋白筛选研究中的应用还很有限。本研究对酵母表面展示系统常用载体 pYD1进行改造，使其与 Clontech 公司的 Smart cDNA…查看全部>>
酵母表面展示多肽片段分析Δ42 PD1的免疫原性北大核心CSCDCSTPCD
作者：程林王子乔徐六妹唐娴周泱王辉
发表期刊：中国免疫学杂志 2016年9期
关键词：程序性细胞死亡受体1Delta-42程序性细胞死亡受体1酵母表面展示免疫原性流式细胞术
摘要：目的：分析Δ42PD1胞外区的免疫原性。方法：将Δ42PD1胞外区编码基因分为6个片段，分别用PCR的方法进行扩增，并克隆至酵母表面展示质粒pCTCON2。分别将重组酵母表达质粒转化酵母细胞，涂布SDCAA平板，挑取单细胞克隆于SGCAA培养基中诱导目的基因的表达。通过肌肉注射Δ42PD1真核表达质粒加局部电穿孔的方法免疫BALB／c小鼠，制备鼠抗人Δ42PD1免疫血清。用流式细胞术的方法分析免疫血清与酵母表面展示的Δ42PD1…查看全部>>
鱼类传染性造血器官坏死病毒糖蛋白的酵母表面展示北大核心CSCDCSTPCD
作者：赵景壮徐黎明刘淼曹永生尹家胜刘红柏卢彤岩
发表期刊：水产学报 2016年7期
关键词：传染性造血器官坏死病病毒糖蛋白真核表达酵母表面展示
摘要：糖蛋白(glycoprotein,G)是鱼类传染性造血器官坏死病毒的主要表面抗原,是病毒检测及疫苗研制的主要靶基因.为了对其进行酵母表面展示,本研究利用本实验室保存的含有IHNV-Snl203毒株G基因的质粒为模板,PCR扩增富含抗原表位的糖蛋白基因片段后,连接酵母表面展示载体pYD1,构建重组质粒pYDl-G.将pYDl-G转化酿酒酵母EBY 100细胞后,利用半乳糖诱导G蛋白的表达.利用细胞免疫荧光、Western Blottin…查看全部>>

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